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規(guī)格 ：5ml/10ml/50ml 

保存：-20℃避光保存，一年有效。 

產(chǎn)品簡(jiǎn)介： Hoechst 33258，也稱 bisBenzimide H 33258 或 HOE 33258，是一種可以穿透細(xì)胞膜的藍(lán)色熒光染料，對(duì)細(xì)胞的毒性較低。Hoechst 33258 染色常用于細(xì)胞凋亡檢測(cè)，染色后用熒光顯微鏡觀察或流式細(xì)胞儀檢測(cè)。Hoechst 33258 也常用于普通的細(xì)胞核染色，或常規(guī)的 DNA 染色。Hoechst 33258 的最大激發(fā)波長為 346nm，最大發(fā)射波長為 460nm；Hoechst 33258 和雙鏈 DNA 結(jié)合后，最大激發(fā)波長為 352nm，最大發(fā)射波長為 461nm。本 Hoechst 33258 染色液可直接用于固定細(xì)胞或組織的細(xì)胞核染色，也可直接用于活細(xì)胞或組織的細(xì)胞核染色。 

使用說明： 

1. 對(duì)于固定的細(xì)胞或組織： 

a. 對(duì)于細(xì)胞或組織樣品，固定后，適當(dāng)洗滌去除固定劑。隨后如果需要進(jìn)行免疫熒光染色，則先進(jìn)行免疫熒光染色，染色完畢后再按后續(xù)步驟進(jìn)行 Hoechst 33258 染色。如果不需要進(jìn)行其它染色，則直接進(jìn)行后續(xù)的 Hoechst 33258 染色。 

b. 對(duì)于貼壁細(xì)胞或組織切片，加入少量 Hoechst 33258 染色液，覆蓋住樣品即可；對(duì)于懸浮細(xì)胞，至少加入待染色樣品體積 3 倍的染色液，混勻。室溫放置 3-5 分鐘。 

c. 吸除 Hoechst 33258 染色液，用 TBST、PBS 或生理鹽水洗滌 2-3 次，每次 3-5 分鐘。 

d. 直接在熒光顯微鏡下觀察或封片后熒光顯微鏡下觀察。細(xì)胞發(fā)生凋亡時(shí)，會(huì)看到凋亡細(xì)胞的細(xì)胞核呈致密濃染，或呈碎塊狀致密濃染。 

2. 對(duì)于活細(xì)胞或組織： 

a. 加入適當(dāng)量 Hoechst 33258 染色液，必須充分覆蓋住待染色的樣品，通常對(duì)于六孔板一個(gè)孔需加入 1ml 染色液，對(duì)于 96 孔板一個(gè)孔需加入 100 微升染色液。 

b. 在適宜于細(xì)胞培養(yǎng)的溫度下培養(yǎng) 20-30 分鐘。棄染色液，用 PBS 或培養(yǎng)液洗滌 2-3 次即可進(jìn)行熒光檢測(cè)。